细胞简介：
小鼠肝星形细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的—个器官， 并在身体里面起看去氧化、储存肝糖、分
泌性蛋白质的合成等作用， 肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里*大的器官，位于机体中的腹部位置，在右
侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方， 胃的上方。肝脏是机体消化系统中*大的消化腺，为—红棕色的V
字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的谢要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏
在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所覆盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁， 肝上面则与膈及腹前壁
相接。肝星形细胞(HSC) 又名肝贮脂细胞、维生素A贮存细胞、窦周细胞、Ito细胞等，是肝脏细胞外基质的主要来源。
HSC在激活后可进—步转化为肌成纤维细胞样细胞，各种可导致肝纤维化的因素均将HSC作为*终靶细胞。正常情况下，
HSC处于静止状态，当肝脏发生炎症反应或受到机械刺激等损伤时， HSC的表型由静止型转变为激活型，激活的H SC可通
过增生和分泌细胞外基质参与肝纤维化的形成及肝内结构的重建， 此过程也是肝纤维化的中心环节。肝星形细胞分布于肝
脏的Disse间隙内，是合成分泌细胞外基质的主要来洒，在肝纤维化的发生中处于*重要地位。肝星形细胞是肝脏特有的
间充质细胞，约占肝脏细胞总数的8%-13%。作为肝脏合成细胞外基质的主要细胞群，肝星形细胞不仅能分泌蛋白多糖、
糖蛋白等细胞外基质成分，合成—定量的胶原酶以维持正常的基底膜结构，还能通过其突起的收缩参与肝窦的微循环调
节。此外， 肝星形细胞能通过合成肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子等促进肝细胞增殖和肝再生。
培养基信息
我们推荐使用合肥星肽生物科技有限公司小鼠肝星形细胞专用完全培养基作为体外培养小鼠肝星形细胞的培养基
小鼠肝星形细胞接受后处理
1) 收到非红系有核细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
小鼠肝星形细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。**天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
小鼠肝星形细胞培养注意事项
1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
合肥星肽生物科技有限公司作为美国ATCC专业代理商，专业经营ATCC菌种、ATCC原代细胞、培养基、抗体、生物试剂、耗材等，合肥星肽生物科技有限公司与ATCC共同努力致力于为客户提供可靠的研究材料以及方便快捷的服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到*终售后的确保项目准确到位，都有相关专业人士进行维护,确保您在合肥星肽生物科技有限公司获得*上等服务！
公司网址：http://www.qingbio.com
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关于合肥星肽生物科技有限公司
合肥星肽生物科技有限公司是一家致力于生命科学和生物技术领域的高科技企业，公司地址位于科教名城———合肥市。公司主营多肽合成、多肽定制、多肽纯化等多肽制备多肽技术服务。在合肥市与中科院的关怀下，2021年初合肥市高新区与中科院分别与合肥星肽生物科技有限公司签订了战略投资协议。
公司位于合肥市高新区安徽中科资城创业孵化器A区，拥有2000平方米独立研发中心以及无菌实验室，四条完善的多肽生产线，配备了Waters LC- MS/MS、Waters UPLC、Waters 全自动纯化仪、岛津LCMS、全自动冻干系统、紫外分光光度计等专用精密仪器保障合肥星肽生物科技有限公司月产3000条精品多肽的生产能力，这些得以让我们可以为客户快速准确的提供各种高质量的多肽产品及服务。
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