人脐静脉血管内皮细胞的接种培养
细胞接种培养
1、细胞接种：
（1）、包被液：用去离水配制0.5%明胶溶液，过滤除菌。
（2）、人脐静脉血管内皮细胞培养瓶包被：取2-4个T25培养瓶，每个培养瓶加2－3ml0.5%明胶溶液，摇匀使包被液布满培养瓶底面，置37℃2小时或放置过夜。
（3）、接种细胞：人脐静脉血管内皮细胞接种前吸净包被液，按2500－5000个细胞/cm接种细胞（1支5×10个细胞可接种2-4个培养瓶），每瓶加培养液3-5ml,摇匀后置37℃5%CO2培养箱内培养24小时，此时细胞已完全贴壁，更换培养液后继续在37℃5%CO2培养箱内培养。
（4）、扩大培养：一般每周更换培养液2次，至细胞长至覆盖培养面的70-80%可进行传代或冻存。
细胞冻存
调整细胞数2-5×10个/ml，按含细胞的RPMI-1640液ml数，配制等量的冻存液。冻存液中FBS占80%，DMSO占20%。例：含细胞的RPMI-1640液为8ml，应配冻存液8ml，其中FBS为6.4ml,DMSO为1.6ml，混匀。置细胞悬液于冰浴中，逐滴加入冻存液，边加边摇动。加完后用吸管吹打混匀。于冰浴中分装细胞于冻存管中，1.8ml/管，再将冻存管置于冻存盒内置-80℃冰箱，24小时后转入液氮中保存。
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