细胞培养技术服务

细胞培养技术服务

服务编码

项目名称

项目报价

项目周期

BT5001

细胞培养

2000元

1-2周

BT5002

细胞瞬时转染

3000元

1-2周

BT5003

稳定细胞系构建

咨询

咨询

一、服务内容

1、细胞转染和稳定表达细胞株筛选

通过转染试剂或电穿孔方式等方式,将目的基因导入贴壁细胞或悬浮细胞24-48小时后,目的基因即在细胞内表达。此时为了建立稳定细胞系,可根据不同基因载体中所含的抗性标记,选用相应的药物对靶细胞进行筛选,从而得到稳定表达外源基因的细胞克隆。观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(短时间即可进行观察,但效应会很快丢失)。

2、针对不同种类细胞使用药物,低氧,压力等外源因素进行刺激等处理,建立相关的细胞模型,从而进行后续的研究工作。

二、样品要求(样品处理及保存见附件)

1干冰运输:取对数生长期的细胞,消化后低速离心1000rpm5min收集细胞,加入适量配制好的冻存液后吹打均匀。将细胞分装入冻存管中,标明细胞的名称、细胞代次、冻存时间及操作者;放4℃冰箱30min-2030min1h-80℃过液,然后放入液氮罐;细胞数目不少于5×106/ml

2常温运输:细胞贴壁覆盖瓶底面积达40%以上时,装满培养液,瓶口用封口膜封好,装入盒子,盒子里用泡沫或棉花塞满,让瓶子固定在盒子中。

三、服务特点

1、针对不同细胞系筛选合适的转染试剂和质粒浓度配比,提高转染效率和蛋白表达量

2、丰富的抗生素筛选经验和单细胞克隆鉴定方法提高实验效率

3、构建的稳定表达细胞株可稳定传代,极少发生性状丢失

四、收费标准

服务项目

收费标准¥

实验周期

蛋白瞬时表达或敲低

基因表达或敲低载体构建

请参见载体构建目录

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

载体转染

3000/样品

1

Western Blot检测蛋白表达或敲低

2000/目的蛋白/

2

蛋白稳定表达细胞株构建(混合克隆)

表达载体构建

请参见载体构建目录

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

转染和抗生素筛选

40000/细胞系

3-4

Western Blot检测稳定细胞株蛋白表达

2000/目的蛋白/

2

蛋白稳定表达细胞株构建(单克隆)

表达载体构建

请参见载体构建目录

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

转染和抗生素筛选

50000/细胞系

6-8

Western Blot检测稳定细胞株蛋白表达

2000/目的蛋白/

2

蛋白敲低细胞系构建(单克隆)

shRNA表达载体的构建

请参见载体构建目录

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

转染和抗生素筛选

60000/细胞系

6-8

Western Blot检测敲低细胞株蛋白表达

2000/目的蛋白/

2

蛋白真核表达(分泌表达)

分泌型表达载体的构建

请参见载体构建目录

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

细胞转染

3000/质粒

2

蛋白表达检测(Western Blot ELISA

2000/目的蛋白/膜;600/

2

蛋白表达和纯化

20000/mg

2

五、客户提供材料

1、待克隆基因和载体信息,待敲低基因信息和shRNA序列信息(如无相关shRNA序列信息,本公司可代为设计并收取相关费用);

2、待转染细胞株(如需使用常用肿瘤细胞株,如293/293THeLa等可由本公司提供);

3、阳性对照样品(尽量提供)

4、相关文献(可选)

六、提交给客户结果

1、构建完成的载体和甘油菌株;

2完整测序报告和序列碱基图

3、载体真核表达鉴定结果

4、载体真核表达蛋白

5、稳定表达细胞株>1×107

6、稳定敲低细胞株>1×107

7、完整实验报告(包括基因扩增图,细胞株过表达和敲低检测结果图等)







皖公网安备 34010402700852号